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Melamina maka kontaminante ai-han ne'ebé rekoñesidu ne'ebé bele prezente iha kategoria ai-han balu tantu asidentalmente no intensionalmente. Objetivu husi estudu ida-ne'e maka atu verifika deteksaun no kuantifikasaun husi melamina iha fórmula bebé nian no susu-been pó. Totál amostra ai-han 40 ne'ebé disponivel iha merkadu, inklui fórmula ba bebé no susu-been pó, hosi rejiaun oioin iha Iraun maka analiza ona. Konteúdu melamina aprosimadu hosi amostra sira determina uza sistema kromatografia líkidu-ultravioleta (HPLC-UV) ho dezempeñu aas. Kurva kalibrasaun ida (R2 = 0.9925) konstrui ona ba deteksaun melamina iha intervalu 0.1–1.2 μg mL−1. Limite sira kuantifikasaun no deteksaun nian maka 1 μg mL−1 no 3 μg mL−1, respetivamente. Melamina koko iha fórmula ba bebé no susu-been pó no rezultadu sira hatudu katak nível melamina iha amostra fórmula ba bebé no susu-been pó maka 0.001–0.095 mg kg−1 no 0.001–0.004 mg kg−1, respetivamente. Valór sira-ne'e tuir lejislasaun UE nian no Codex Alimentarius. Importante atu nota katak konsumu produtu susubeen sira-ne'e ho konteúdu melamina ne'ebé redús la hamosu risku signifikativu ba saúde konsumidór nian. Ida-ne'e mós hetan apoiu hosi rezultadu sira hosi avaliasaun risku nian.
Melamina maka kompostu orgániku ida ho fórmula molekulár C3H6N6, ne'ebé mai hosi sianamida. Ida-ne'e iha solubilidade ne'ebé ki'ik tebes iha bee no maizumenus 66% nitrojéniu. Melamina maka kompostu industriál ne'ebé uza barak ho uzu lejítimu oioin iha produsaun plástiku, adubu, no ekipamentu prosesamentu ai-han (inklui embalajen ai-han no sasán dapur nian)1,2. Melamina mós uza hanesan portadór ai-moruk nian ba tratamentu moras sira. Proporsaun aas hosi nitrojéniu iha melamina bele hamosu utilizasaun sala hosi kompostu no fó propriedade sira hosi molékula proteína nian ba ingrediente ai-han nian3,4. Tanba ne'e, aumenta melamina ba produtu ai-han sira, inklui produtu susubeen nian, aumenta konteúdu nitrojéniu. Nune'e, konklui sala katak konteúdu proteína hosi susubeen aas liu duké loloos.
Ba kada grama melamina ne'ebé aumenta, konteúdu proteína ai-han nian sei aumenta 0.4%. Maibé, melamina soluvel tebes iha bee no bele hamosu prejuízu ne'ebé maka'as liu. Hatama melamina grama 1.3 ba produtu líkidu sira hanesan susu-been bele aumenta susu-been nia konteúdu proteína 30%5,6. Maski melamina aumenta ba ai-han animál no mós ema nian hodi aumenta konteúdu proteína7, Komisaun Codex Alimentarius (CAC) no autoridade nasionál sira seidauk aprova melamina nu'udar aditivu ai-han nian no lista ona hanesan perigozu bainhira tolan, dada iis, ka absorve liuhosi kulit. Iha tinan 2012, Organizasaun Mundiál Saúde (OMS) nia Ajénsia Internasionál ba Peskiza kona-ba Kankru lista melamina hanesan karsinojéniu Klase 2B tanba bele prejudika ema nia saúde8. Espozisaun ba tempu naruk ba melamina bele kauza kankru ka estragu ba rins2. Melamina iha ai-han bele kompleksu ho ásidu sianúriku hodi forma kristal mean ne'ebé la rezolve iha bee ne'ebé bele kauza estragu ba rins no tesidu bexiga nian, no mós kankru iha via urinária no lakon todan9,10. Ida-ne'e bele kauza envenenamentu ai-han agudu no, iha konsentrasaun aas, mate, liuliu iha kosok-oan no labarik ki'ik sira.11 Organizasaun Mundiál Saúde (OMS) mós estabelese ona konsumu tolerável diáriu (TDI) melamina nian ba ema iha 0.2 mg/kg pezu isin nian kada loron bazeia ba matadalan sira CAC nian.12 Administrasaun Ai-han no Medikamentu EUA nian (EUA) estabelese ona nivel másimu residuu melamina nian ba melamina 1 mg/kg iha fórmula ba bebé no 2.5 mg/kg iha ai-han sira seluk.2,7 Iha Setembru 2008, relata katak fabrikante fórmula ba bebé doméstiku oioin aumenta ona melamina ba susu-been pó hodi aumenta konteúdu proteína hosi sira nia produtu, ne'ebé rezulta iha envenenamentu susu-been pó no hamosu insidente envenenamentu melamina iha nasaun tomak ne'ebé halo labarik sira moras liu 2004 no 2004 tama ospitál liu 50,000. 13
Fó susu-been inan nian la'ós sempre posivel tanba fatór oioin hanesan difikuldade sira moris iha sidade, moras hosi inan ka oan, ne'ebé lori ba utilizasaun fórmula ba bebé hodi fó-han ba kosok-oan sira. Nu'udar rezultadu, fábrika sira estabelese ona atu produz fórmula ba bebé ne'ebé besik liu posivel ba susubeen inan nian iha kompozisaun14. Formula ba bebé ne’ebé fa’an iha merkadu baibain halo husi susu-been karau nian no baibain halo ho mistura espesiál husi bokur, proteína, karboidratu, vitamina, minerál no kompostu sira seluk. Atu bele besik ba susubeen inan nian, konteúdu proteína no bokur hosi fórmula ne'e varia, no depende ba tipu susubeen nian, sira fortifika ho kompostu sira hanesan vitamina no minerál sira hanesan ferru15. Tanba kosok-oan sira maka grupu ida ne'ebé sensivel no iha risku ba envenenamentu, seguransa hosi konsumu susubeen-been iha importánsia vital ba saúde. Hafoin kazu envenenamentu melamina entre kosok-oan xinés sira, nasaun sira iha mundu tomak tau atensaun maka'as ba kestaun ne'e, no sensibilidade hosi área ne'e mós aumenta. Tanba ne'e, importante liu atu hametin kontrolu ba produsaun fórmula ba kosok-oan sira atu nune'e bele proteje saúde kosok-oan sira-nian. Iha métodu oioin atu detekta melamina iha ai-han, inklui kromatografia líkidu ho dezempeñu aas (HPLC), eletroforeze, métodu sensoriál, espektrofotometria no ensaiu imunosorbente ligadu ho enzima antikorpu-antíjenu16. Iha tinan 2007, Administrasaun Ai-han no Medikamentu (FDA) Estadus Unidus nian dezenvolve no publika métodu HPLC ida ba determinasaun melamina no ásidu sianúriku iha ai-han, ne'ebé maka métodu ne'ebé efetivu liu atu determina konteúdu melamina17.
Konsentrasaun melamina iha fórmula bebé nian ne'ebé sukat uza téknika foun espektroskopia infra-mean nian varia hosi 0.33 to'o 0.96 miligrama kada kilograma (mg kg-1). 18 Estudu ida iha Sri Lanka hetan katak nível sira melamina nian iha susubeen pó tomak varia entre 0.39 to'o 0.84 mg kg-1. Aleinde ne'e, amostra sira fórmula bebé nian ne'ebé importadu iha nível aas liu hosi melamina, iha 0.96 no 0.94 mg/kg, respetivamente. Nivel sira-ne'e iha limite regulatóriu nia okos (1 mg/kg), maibé presiza programa monitorizasaun ida ba seguransa konsumidór nian. 19
Estudu oioin ezamina ona nível sira melamina nian iha fórmula ba bebé Iraun nian. Besik 65% hosi amostra sira kontein melamina, ho média 0.73 mg/kg no másimu 3.63 mg/kg. Estudu seluk relata katak nível melamina iha fórmula bebé nian varia entre 0.35 to'o 3.40 μg/kg, ho média 1.38 μg/kg. Jeralmente, prezensa no nível melamina nian iha fórmula bebé Iraun nian hetan ona avaliasaun iha estudu oioin, ho amostra balu ne'ebé kontein melamina liu limite másimu ne'ebé estabelese hosi autoridade reguladora sira (2.5 mg/kg/ai-han).
Konsidera konsumu diretu no indiretu ne'ebé maka'as hosi susubeen-been iha indústria ai-han no importánsia espesiál hosi fórmula ba bebé iha fó-han ba labarik sira, estudu ida-ne'e hakarak atu valida métodu deteksaun hosi melamina iha susubeen-been-been no fórmula ba bebé. Tuir loloos, objetivu dahuluk hosi estudu ida-ne'e maka atu dezenvolve métodu kuantitativu ida ne'ebé lalais, simples no loos hodi detekta adulterasaun melamina iha fórmula ba bebé no susu-been pó uza kromatografia líkidu ho dezempeñu aas (HPLC) no deteksaun ultravioleta (UV); Segundu, objetivu husi estudu ida-ne'e maka atu determina konteúdu melamina iha fórmula bebé nian no susu-been pó ne'ebé fa'an iha merkadu Iraun nian.
Instrumentu sira ne'ebé uza ba análize melamina nian varia depende ba fatin produsaun ai-han nian. Métodu análize HPLC-UV ne'ebé sensivel no konfiável uza hodi sukat rezíduu melamina iha susubeen no fórmula bebé nian. Produtu sira susubeen nian iha proteína no bokur oioin ne'ebé bele interfere ho sasukat melamina nian. Tanba ne'e, hanesan nota hosi Sun et al. 22, estratéjia limpeza ida ne'ebé apropriadu no efetivu maka nesesáriu molok halo análize instrumentál. Iha estudu ida-ne'e, ami uza filtru seringa ne'ebé uza dala ida de'it. Iha estudu ida-ne'e, ami uza koluna C18 hodi haketak melamina iha fórmula bebé nian no susu-been pó. Figura 1 hatudu kromatograma ba deteksaun melamina. Aleinde ne'e, rekuperasaun husi amostra sira ne'ebé kontein 0.1–1.2 mg/kg melamina varia husi 95% to'o 109%, ekuasaun regresaun maka y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925), no valór sira deviasaun padraun relativu (RSD) nian varia husi 8 to'o 8%. Dadus ne'ebé disponivel indika katak métodu ne'e konfiável iha konsentrasaun ne'ebé estuda (Tabela 1). Limite instrumentál ba deteksaun (LOD) no limite ba kuantifikasaun (LOQ) husi melamina maka 1 μg mL−1 no 3 μg mL−1, respetivamente. Aleinde ne'e, espektru UV husi melamina hatudu banda absorsaun iha 242 nm. Métodu deteksaun ne'e sensivel, konfiável no loos. Métodu ida-ne'e bele uza ba determinasaun rutina ba nível melamina nian.
Rezultadu sira ne'ebé hanesan publika ona hosi autór oioin. Métodu kromatografia líkidu-array fotodiodu (HPLC) ho dezempeñu aas dezenvolve ona ba análize melamina iha produtu susubeen nian. Limite sira kuantifikasaun nian ne'ebé ki'ik liu maka 340 μg kg−1 ba susu-been pó no 280 μg kg−1 ba fórmula bebé nian iha 240 nm. Filazzi et al. (2012) relata katak melamina la hetan detekta iha fórmula bebé nian liuhosi HPLC. Maibé, 8% hosi amostra sira susu-been nian kontein melamina iha nivel 0.505–0.86 mg/kg. Tittlemiet et al.23 hala'o estudu ida ne'ebé hanesan no determina konteúdu melamina husi fórmula bebé nian (númeru amostra: 72) liuhosi kromatografia líkidu ho dezempeñu aas-espektrometria massa/MS (HPLC-MS/MS) maizumenus 0.0431–0.346 mg kg−1. Iha estudu ida ne'ebé hala'o hosi Venkatasamy et al. (2010), aprosimasaun kímika verde (lahó asetonitrilu) no kromatografia líkidu ho dezempeñu aas faze inversa (RP-HPLC) uza hodi halo estimasaun ba melamina iha fórmula no susubeen bebé nian. Konsentrasaun amostra nian maka entre 1.0 to'o 80 g/mL no resposta maka linear (r > 0.999). Métodu hatudu rekuperasaun 97.2–101.2 iha konsentrasaun 5–40 g/mL no reprodutibilidade menus husi 1.0% deviasaun padraun relativu. Aleinde ne'e, LOD no LOQ ne'ebé observa maka 0.1 g mL−1 no 0.2 g mL−124, respetivamente. Lutter et al. (2011) determina kontaminasaun melamina iha susubeen karau nian no fórmula bebé nian ho baze iha susubeen uza HPLC-UV. Konsentrasaun melamina nian varia hosi < 0.2 to'o 2.52 mg kg−1. Range dinámiku lineár hosi métodu HPLC-UV maka 0.05 to'o 2.5 mg kg−1 ba susubeen karau nian, 0.13 to'o 6.25 mg kg−1 ba fórmula bebé nian ho frasaun massa proteína nian <15%, no 0.25 to'o 12.5 mg kg−1 ba fórmula fórmula bebé nian ho frasaun massa proteina nian 15%. Rezultadu LOD (no LOQ) maka 0.03 mg kg−1 (0.09 mg kg−1) ba susu-been karau nian, 0.06 mg kg−1 (0.18 mg kg−1) ba fórmula bebé <15% proteína, no 0.12 mg kg−1 (0.36 mg kg kg−1) ba bebé fórmula 15% proteina ho sinál ho sinál rasio 3 no 1025 ba LOD no LOQ, respetivamente. Diebes et al. (2012) investiga nível sira melamina nian iha amostra sira fórmula ba bebé no susu-been pó uza HPLC/DMD. Iha fórmula bebé nian, nível ki'ik liu no aas liu maka 9.49 mg kg−1 no 258 mg kg−1, respetivamente. Limite deteksaun (LOD) maka 0.05 mg kg−1.
Javaid et al. relata katak rezíduu melamina iha fórmula bebé nian iha intervalu 0.002–2 mg kg−1 liuhosi espektroskopia infra-mean transforma Fourier (FT-MIR) (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3.5 mg kg−1). Rezai et al.27 propoin métodu HPLC-DDA (λ = 220 nm) hodi halo estimasaun ba melamina no atinji LOQ 0.08 μg mL−1 ba susu-been pó, ne'ebé ki'ik liu duké nivel ne'ebé hetan iha estudu ida-ne'e. Sun et al. dezenvolve RP-HPLC-DAD ida ba deteksaun melamina iha susubeen líkidu liuhosi estrasaun faze sólidu (SPE). Sira hetan LOD no LOQ 18 no 60 μg kg−128, respetivamente, ne'ebé maka sensivel liu duké estudu atuál. Montesano et al. konfirma ona efikásia hosi métodu HPLC-DMD ba avaliasaun konteúdu melamina iha suplementu proteína ho limite kuantifikasaun 0.05–3 mg/kg, ne'ebé ladún sensivel duké métodu ne'ebé uza iha estudu ida-ne'e29.
La iha dúvida, laboratóriu analítiku sira hala'o papél importante ida hodi proteje ambiente liuhosi monitorizasaun ba poluente sira iha amostra oioin. Maibé, uza númeru boot ida hosi reajente no solvente sira durante análize bele rezulta iha formasaun hosi rezíduu perigozu sira. Tanba ne'e, kímika analítika verde (GAC) dezenvolve iha tinan 2000 atu hamenus ka halakon efeitu adversu sira hosi prosedimentu analítika sira ba operadór sira no ambiente26. Métodu tradisionál sira deteksaun melamina nian inklui kromatografia, eletroforeze, eletroforeze kapilar, no ensaiu imunosorbente ligadu ho enzima (ELISA) uza ona hodi identifika melamina. Maibé, entre métodu deteksaun oioin, sensor eletrokímiku sira atrai ona atensaun barak tanba sira nia sensibilidade exelente, seletividade, tempu análize ne'ebé lalais, no karakterístika sira ne'ebé amigavel ba utilizadór30,31. Nanoteknolojia verde utiliza dalan biolójiku sira hodi sintetiza nanomateriál sira, ne'ebé bele hamenus jerasaun lixu perigozu no konsumu enerjia, nune'e promove implementasaun prátika sustentável sira. Nanokompozitu sira, porezemplu, halo hosi materiál sira ne'ebé amigavel ba ambiente, bele uza iha biosensor sira hodi detekta substánsia sira hanesan melamina32,33,34.
Estudu hatudu katak mikroestrasaun faze sólidu (SPME) uza ho efetivu tanba nia efisiénsia enerjétika no sustentabilidade ne'ebé aas liu kompara ho métodu estrasaun tradisionál sira. Amizade ambientál no efisiénsia enerjétika husi SPME halo nia sai alternativa exelente ida ba métodu estrasaun tradisionál sira iha kímika analítika no fornese métodu ida ne'ebé sustentável no efisiente liu ba preparasaun amostra35.
Iha 2013, Wu et al. dezenvolve ona biosensor ida ne'ebé sensivel tebes no seletivu ba resonánsia plasmon superfísie (mini-SPR) ne'ebé utiliza ligasaun entre melamina no anti-melamina antikorpu sira hodi detekta lalais melamina iha fórmula bebé nian uza imunoensaiu ida. Biosensor SPR kombina ho imunoensaiu (uza albúmina sérum bovinu konjugadu ho melamina) maka teknolojia ida ne'ebé fasil atu uza no ho kustu ki'ik ho limite deteksaun 0.02 μg mL-136 de'it.
Nasiri no Abbasian uza sensor portavel ho potensiál aas iha kombinasaun ho grafenu óxidu-kitosan kompozitu (GOCS) hodi detekta melamina iha amostra komersiál sira37. Métodu ida-ne'e hatudu seletividade, ezatidaun no resposta ne'ebé aas tebes. Sensor GOCS hatudu sensibilidade ne'ebé notável (239.1 μM−1), luan linear ida husi 0.01 to'o 200 μM, konstante afinidade ida husi 1.73 × 104, no LOD ida to'o 10 nM. Aleinde ne'e, estudu ida ne'ebé hala'o hosi Chandrasekhar et al. iha 2024 adota aprosimasaun ida ne'ebé amigavel ba ambiente no kustu-efetivu. Sira uza extratu kulit papaya nian hanesan ajente redutor ida hodi sintetiza nanopartikula sira óxidu zinku nian (ZnO-NPs) iha métodu ida ne'ebé amigavel ba ambiente. Tuir mai, téknika espektroskopia mikro-Raman úniku ida dezenvolve ona ba determinasaun melamina iha fórmula bebé nian. ZnO-NPs ne'ebé mai hosi lixu agríkola hatudu ona potensiál hanesan instrumentu diagnóstiku ida ne'ebé iha valór no teknolojia ida ne'ebé konfiável, ho kustu ki'ik ba monitorizasaun no deteksaun melamina38.
Alizadeh et al. (2024) uza plataforma fluoresénsia metal-orgánika (MOF) ne'ebé sensivel tebes hodi determina melamina iha susu-been pó. Alkanse lineár no limite deteksaun ki'ik liu hosi sensor, ne'ebé determina uza 3σ/S, maka 40 to'o 396.45 nM (ekivalente ba 25 μg kg−1 to'o 0.25 mg kg−1) no 40 nM (ekivalente ba 25 μg kg−1), respetivamente. Intervalu ida-ne'e ki'ik liu hosi nível rezíduu másimu (MRLs) ne'ebé estabelese ba identifikasaun melamina iha fórmula bebé nian (1 mg kg−1) no amostra ai-han/ai-han sira seluk (2.5 mg kg−1). Sensor fluorescente (terbium (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) hatudu ezatidaun aas liu no kapasidade sasukat ne'ebé presiza liu duké HPLC39 hodi detekta melamina iha susu-been pó. Biosensor sira no nanokompozitu sira iha kímika verde la'ós de'it hasa'e kapasidade deteksaun nian maibé mós minimiza perigu ambientál sira tuir prinsípiu dezenvolvimentu sustentável sira.
Prinsípiu sira kímika verde nian aplika ona ba métodu oioin ba determinasaun melamina nian. Aprosimasaun ida maka dezenvolvimentu hosi métodu mikroestrasaun faze sólidu dispersivu verde ida uza polímeru polar naturál β-siklodextrina ne'ebé liga ho ásidu sítriku ba estrasaun efisiente hosi melamina 40 hosi amostra sira hanesan fórmula ba bebé no bee-manas. Métodu seluk uza reasaun Mannich ba determinasaun melamina iha amostra susubeen nian. Métodu ida-ne'e baratu, amigavel ba ambiente, no ho ezatidaun maka'as ho luan linear 0.1–2.5 ppm no limite deteksaun ne'ebé ki'ik 41. Aleinde ne'e, métodu ida ne'ebé kustu-efetivu no amigavel ba ambiente ba determinasaun kuantitativu melamina iha susubeen líkidu no fórmula ba kosok-oan dezenvolve uza infraespetu transmisaun Fourier ho limite akurasia no ezatidaun aas 1 ppm no 3.5 ppm, respetivamente 42. Métodu sira-ne'e hatudu aplikasaun prinsípiu sira kímika verde nian ba dezenvolvimentu métodu sira ne'ebé efisiente no sustentável ba determinasaun melamina nian.
Estudu oioin propoin ona métodu inovativu sira ba deteksaun melamina, hanesan uza estrasaun faze sólidu no kromatografia líkidu ho dezempeñu aas (HPLC)43, no mós kromatografia líkidu ho dezempeñu aas lalais (HPLC), ne'ebé la presiza pré-tratamentu kompleksu ka reajente par-ion, nune'e hamenus kuantidade lixu kímiku444. Métodu sira-ne'e la'ós de'it fornese rezultadu sira ne'ebé loos ba determinasaun melamina iha produtu sira susubeen nian, maibé mós kumpre ho prinsípiu sira kímika verde nian, hodi minimiza utilizasaun kímiku perigozu sira no hamenus impaktu ambientál jerál hosi prosesu analítiku.
Amostra haat-nulu hosi marka oioin koko iha triplikadu, no rezultadu sira aprezenta iha Tabela 2. Nivel melamina iha amostra fórmula ba bebé no susu-been pó varia hosi 0.001 to'o 0.004 mg/kg no hosi 0.001 to'o 0.095 mg/kg, respetivamente. Laiha mudansa signifikativa sira ne'ebé maka observa entre grupu idade tolu hosi fórmula bebé nian. Aleinde ne'e, melamina hetan detekta iha 80% hosi susu-been pó, maibé 65% hosi fórmula bebé nian hetan kontaminasaun ho melamina.
Konteúdu melamina iha susu-been pó industriál aas liu duké iha fórmula bebé nian, no diferensa ne'e signifikativu (p<0.05) (Figura 2).
Rezultadu sira ne'ebé hetan maka menus hosi limite sira ne'ebé estabelese ona hosi FDA (menus liu 1 no 2.5 mg/kg). Aleinde ne'e, rezultadu sira tuir limite sira ne'ebé estabelese hosi CAC (2010) no EU45,46, katak limite másimu ne'ebé permitidu maka 1 mg kg-1 ba fórmula infantil no 2.5 mg kg-1 ba produtu susubeen nian.
Tuir estudu ida iha 2023 hosi Ghanati et al.47, konteúdu melamina iha tipu oioin hosi susubeen embaladu iha Iraun varia hosi 50.7 to'o 790 μg kg−1. Sira nia rezultadu sira iha limite permisivel FDA nia okos. Ami nia rezultadu sira ki'ik liu duké Shoder et al.48 no Rima et al.49. Shoder et al. (2010) hetan katak nível melamina iha susu-been pó (n=49) ne'ebé determina hosi ELISA varia hosi 0.5 to'o 5.5 mg/kg. Rima et al. analiza restu melamina iha susu-been pó liuhosi espektrofotometria fluoresénsia no hetan katak konteúdu melamina iha susu-been pó maka 0.72–5.76 mg/kg. Estudu ida hala'o iha Kanadá iha 2011 hodi monitoriza nível sira melamina nian iha fórmula bebé nian (n=94) uza kromatografia líkidu (LC/MS). Konsentrasaun melamina nian hetan katak iha limite aseitavel nia okos (padraun preliminár: 0.5 mg kg−1). La provável katak nível melamina fraudulentu ne'ebé detekta maka tátika ida ne'ebé uza hodi aumenta konteúdu proteína nian. Maibé, labele esplika ho utilizasaun adubu, muda konteúdu kontentór, ka fatór sira ne'ebé hanesan. Aleinde ne'e, fonte melamina nian iha susu-been pó ne'ebé importa ba Kanadá la fó sai50.
Hassani et al. sukat konteúdu melamina iha susubeen pó no susubeen líkidu iha merkadu Iraun iha 2013 no hetan rezultadu sira ne'ebé hanesan. Rezultadu sira hatudu katak exetu ba marka ida husi susu-been pó no susu-been líkidu, amostra sira seluk hotu kontaminadu ho melamina, ho nível sira ne'ebé varia husi 1.50 to'o 30.32 μg g−1 iha susu-been pó no 0.11 to'o 1.48 μg ml−1 iha susu-been. Notavelmente, ásidu sianúriku la hetan detekta iha amostra ruma, hodi hamenus posibilidade ba envenenamentu melamina ba konsumidór sira. 51 Estudu anteriór sira avalia ona konsentrasaun melamina iha produtu xokolate sira ne'ebé kontein susu-been pó. Besik 94% hosi amostra importadu sira no 77% hosi amostra iranianu sira iha melamina. Nivel melamina iha amostra importadu sira varia hosi 0.032 to'o 2.692 mg/kg, enkuantu sira iha amostra Iraun nian varia hosi 0.013 to'o 2.600 mg/kg. Jeralmente, melamina hetan detekta iha 85% hosi amostra sira, maibé marka espesífiku ida de'it maka iha nível sira aas liu limite ne'ebé permitidu.44 Tittlemier et al. relata nivel melamina iha susubeen pó ne'ebé varia hosi 0.00528 to'o 0.0122 mg/kg.
Tabela 3 halo rezumu ba rezultadu sira avaliasaun risku nian ba grupu idade tolu. Risku menus husi 1 iha grupu idade hotu-hotu. Nune'e, laiha risku saúde la'ós karsinojéniku hosi melamina iha fórmula bebé nian.
Nivel kontaminasaun ne'ebé ki'ik liu iha produtu susubeen nian bele tanba kontaminasaun la ho intensaun durante preparasaun, enkuantu nivel aas liu bele tanba adisaun intensionál. Aleinde ne'e, risku jerál ba saúde ema nian hosi konsumu produtu susubeen nian ho nível melamina ne'ebé ki'ik konsidera ki'ik. Bele konklui katak konsumu produtu sira ne'ebé kontein nivel melamina ne'ebé ki'ik hanesan ne'e la hamosu risku ruma ba saúde konsumidór nian52.
Konsidera importánsia jestaun seguransa ai-han nian iha indústria susubeen nian, liuliu iha termu sira protesaun saúde públika nian, importante tebes atu dezenvolve no valida métodu ida hodi avalia no kompara nível no rezíduu sira melamina nian iha susubeen-pó no fórmula ba bebé. Métodu espektrofotométriku HPLC-UV ne'ebé simples no loos dezenvolve ona ba determinasaun melamina iha fórmula bebé nian no susu-been pó. Métodu ne'e hetan validasaun atu asegura ninia konfiabilidade no ezatidaun. Limite sira deteksaun no kuantifikasaun nian hosi métodu ne'e hatudu katak sensivel tebes atu sukat nível sira melamina nian iha fórmula bebé nian no susubeen-pó. Tuir ami nia dadus, melamina hetan detekta iha maioria amostra iranianu sira. Nivel melamina hotu-hotu ne'ebé detekta iha limite másimu permitidu nia okos hosi CAC, ne'ebé indika katak konsumu hosi tipu produtu susubeen sira-ne'e la hamosu risku ba ema nia saúde.
Reajente kímiku hotu-hotu ne'ebé uza iha grau analítiku: melamina (2,4,6-triamino-1,3,5-triazine) 99% puru (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO); Acetonitrile ho grau HPLC (Merck, Darmstadt, Alemaña); bee ne'ebé moos tebes (Millipore, Morfheim, Fransa). Filtru sira seringa nian ne'ebé uza dala ida de'it (Chromafil Xtra PVDF-45/25, medida poru nian 0.45 μm, diámetru membrana nian 25 mm) (Macherey-Nagel, Düren, Alemaña).
Banho ultrasóniku (Elma, Alemaña), sentrifuga (Beckman Coulter, Krefeld, Alemaña) no HPLC (KNAUER, Alemaña) uza hodi prepara amostra sira.
Uza ona kromatografia líkidu ho dezempeñu aas (KNAUER, Alemaña) ne'ebé ekipadu ho detetór UV. Kondisaun sira análize HPLC nian maka hanesan tuirmai: uza sistema UHPLC Ultimate ne'ebé ekipadu ho koluna analítika ODS-3 C18 (4.6 mm × 250 mm, medida partikula 5 μm) (MZ, Alemaña). Eluente HPLC (faze móvel) maka mistura TFA/metanol (450:50 mL) ho taxa fluxu 1 mL min-1. Komprimentu onda deteksaun nian maka 242 nm. Volume injesaun maka 100 μL, temperatura koluna nian maka 20 °C. Tanba tempu retensaun ai-moruk nian naruk (minutu 15), injesaun tuirmai tenke halo hafoin minutu 25. Melamina identifika liuhosi kompara tempu retensaun no pontu aas liu espektru UV hosi padraun melamina nian.
Solusaun padraun ida husi melamina (10 μg/mL) prepara uza bee no rai iha jeleira (4 °C) dook husi naroman. Dilui solusaun stock ho faze móvel no prepara solusaun padraun funsionamentu nian. Solusaun padraun ida-idak injekta ba HPLC dala 7. Ekuasaun kalibrasaun 10 kalkula liuhosi análize regresaun hosi área piku ne'ebé determina ona no konsentrasaun ne'ebé determina ona.
Susubeen-karau nia pó ne'ebé disponivel iha merkadu (amostra 20) no amostra sira hosi marka oioin hosi fórmula bebé nian ho baze iha susubeen karau nian (amostra 20) sosa hosi supermerkadu no farmásia lokál sira iha Iraun hodi fó-han ba kosok-oan sira ho grupu idade oioin (fulan 0–6, fulan 6–12, no >fulan 12) no rai iha temperatura jeleira (4°C) to'o análize. Hafoin, 1 ± 0.01 g husi susu-been pó ne'ebé omojenizadu hetan pezu no kahur ho asetonitrilu:bee (50:50, v/v; 5 mL). Mistura ne'e kahur durante minutu 1, hafoin sonika iha banho ultrasóniku durante minutu 30, no ikusmai nakdoko durante minutu 1. Hafoin ne'e, mistura ne'e halo sentrifugasaun iha 9000 × g durante minutu 10 iha temperatura ambiente no supernatante ne'e filtra ba iha vial autosampler 2 ml uza filtru seringa 0.45 μm. Filtradu (250 μl) hafoin ne'e kahur ho bee (750 μl) no injeta ba sistema HPLC10,42.
Atu valida métodu, ami determina rekuperasaun, ezatidaun, limite deteksaun (LOD), limite kuantifikasaun (LOQ), no presizaun iha kondisaun ótimu. LOD define hanesan konteúdu amostra ho altura másimu dala tolu hosi nivel barullu baze. Iha parte seluk, konteúdu amostra ho altura másimu dala 10 hosi rasio sinál-ba-barullu define hanesan LOQ.
Resposta dispozitivu nian determina uza kurva kalibrasaun ne'ebé kompostu hosi pontu dadus hitu. Konteúdu melamina ne'ebé la hanesan uza (0, 0.2, 0.3, 0.5, 0.8, 1 no 1.2). Linearidade hosi prosedimentu kálkulu melamina nian determina ona. Aleinde ne'e, nivel melamina oioin aumenta ba amostra mamuk sira. Kurva kalibrasaun nian konstrui liuhosi injeta beibeik 0.1–1.2 μg mL−1 husi solusaun melamina padraun ida ba iha amostra fórmula bebé nian no susubeen-pó no nia R2 = 0.9925. Akurasi ne'e avalia liuhosi repetibilidade no reprodutibilidade hosi prosedimentu no hetan liuhosi injeta amostra sira iha loron dahuluk no loron tolu tuirmai (iha triplikadu). Repetabilidade hosi métodu ne'e avalia liuhosi kalkula RSD % ba konsentrasaun tolu ne'ebé diferente hosi melamina ne'ebé aumenta. Estudu sira rekuperasaun nian hala'o ona hodi determina presizaun. Grau rekuperasaun nian hosi métodu estrasaun nian kalkula iha nivel tolu hosi konsentrasaun melamina nian (0.1, 1.2, 2) iha amostra sira hosi fórmula bebé nian no susubeen maran9,11,15.
Estimasaun ba konsumu diáriu (EDI) determina uza fórmula tuirmai: EDI = Ci × Cc/BW.
Iha ne'ebé Ci maka konteúdu melamina médiu, Cc maka konsumu susubeen no BW maka pezu médiu labarik sira-nian.
Análize dadus hala'o uza SPSS 24. Normalidade koko uza teste Kolmogorov-Smirnov; dadus hotu-hotu maka teste la'ós paramétriku (p = 0). Tanba ne'e, uza teste Kruskal-Wallis no teste Mann-Whitney hodi determina diferensa signifikativa entre grupu sira.
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